特異性IgE檢測(cè)是一種常用的過敏原診斷方法。它的作用原理是通過檢測(cè)血液中特異性IgE抗體的存在來確定患者是否對(duì)某種過敏原產(chǎn)生了過敏反應(yīng)。
特異性IgE檢測(cè)有多種方法,包括皮膚劃痕試驗(yàn)、皮內(nèi)試驗(yàn)、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))和免疫印跡等技術(shù)。下面將分別介紹這些方法的操作步驟。
皮膚劃痕試驗(yàn)
皮膚劃痕試驗(yàn)是簡(jiǎn)單和常用的特異性IgE檢測(cè)方法之一。其操作步驟如下:
?。?)選擇合適的部位:在前臂或上臂背側(cè)選取清潔、無損傷的皮膚。
?。?)標(biāo)記:用水筆在皮膚上劃出15mm*15mm的正方形,并在正方形內(nèi)使用同一針頭劃3-4個(gè)小孔。
?。?)加入過敏原:使用專業(yè)的劃痕器,在每個(gè)小孔處滴入不同的過敏原溶液。
?。?)刺激:用劃痕器在每個(gè)小孔處輕輕劃過皮膚表面,使過敏原能夠穿過皮膚進(jìn)入組織內(nèi)。
(5)觀察:等待15-20分鐘后,觀察皮膚上是否出現(xiàn)紅斑或水皰等過敏反應(yīng)。
皮內(nèi)試驗(yàn)
皮內(nèi)試驗(yàn)是一種更加靈敏的特異性IgE檢測(cè)方法。其操作步驟如下:
?。?)選擇合適的部位:在前臂或上臂背側(cè)選取清潔、無損傷的皮膚。
(2)標(biāo)記:用水筆在皮膚上劃出15mm*15mm的正方形,并在正方形內(nèi)使用同一針頭注射不同濃度的過敏原溶液。
(3)觀察:等待15-20分鐘后,觀察皮膚上是否出現(xiàn)紅斑或水皰等過敏反應(yīng)。
?。?)測(cè)量:使用皮膚反應(yīng)直徑測(cè)量工具測(cè)量皮膚反應(yīng)的大小,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行記錄和分析。
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))
ELISA是一種基于抗體與抗原結(jié)合的檢測(cè)方法,也可以用于檢測(cè)特異性IgE。其操作步驟如下:
?。?)制備樣品:采集患者血液樣品,并將其離心分離血清。
?。?)制備檢測(cè)板:在96孔板上固定過敏原或抗原,并用BSA(牛血清白蛋白)等物質(zhì)封閉孔洞,避免非特異性結(jié)合。
?。?)加入樣品:將標(biāo)記有酶的抗IgE抗體添加到每個(gè)孔中,然后加入患者血清樣品,使其與被固定的抗原結(jié)合。
(4)洗滌:移除未結(jié)合的物質(zhì)。
(5)加入底物:加入底物,使標(biāo)記的酶能夠反應(yīng),產(chǎn)生發(fā)光信號(hào)。
?。?)測(cè)量:使用ELISA閱讀器測(cè)量每個(gè)孔的發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分